w***a
发帖数: 4361 | 1 这么简单的应用随便哪个real time PCR都能做，
貌似biorad的机器都便宜些吧。我估计ABI会更好些。
我们lab以前一直用的是 iCYCLER， biorad上一代的机器，也没啥问题。现在这个
CFX96更fancy一点，run一个plate大约就1个小时，完了还会自动把结果发email到你的
信箱。 |
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A******y
发帖数: 2041 | 2 Biorad gel is thinner and can run and transfer at 300V in tris buffer (w/
SDS etc). If you are used to Invitrogen get, you might not like it.
Quality wise is about the same except biorad is cheaper. Invitrogen came
out with a similar package but I don't see where the discount is. |
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m******e
发帖数: 1932 | 3 求问：这两个机器哪个好？主要跑taqman和sybr，也有可能会用到hrm。这两天demo,
感觉Roche的在小amplicon上的well to well variation比biorad小，但amplicon大一
些, roche的well to well variation就大得多，而biorad不论Amplicon size，表现都
挺稳定。有经验的同学们请多多指教！谢谢！ |
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c******k
发帖数: 252 | 4 我们老板拿到stimulation的funding买一台multi-color PCR 机器，倒霉的我负责收集
信息，好选择型号。现在找的是Applied Biosystem的stepone plus和9700HT. biorad
的CFX96. 请用过的达人给点建议吧， 谢谢了！ |
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w***a
发帖数: 4361 | 5 我们实验室用这个钱刚买了台CFX96...
biorad |
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A***g
发帖数: 191 | 6 最近在做western，不想用湿转，可是这个半干转效率也太差了呀，用的是Biorad的
Precision plus双色的预染marker，结果怎样延长时间（15v 22min 或者10v 36 min,
protocol是建议15v 15min or 10v 30min的）， 那个75kd以上的基本上都还留在胶上
，没能转到膜上。目的条带说是在76KD的，这样的转膜效率让我怎么往下做啊。
我用的是PVDF膜。
恳请赐教啊，转膜buffer, 滤纸 有什么要注意的吗 |
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B******o
发帖数: 496 | 7 你说的Semi-Dry? 效率挺高的啊。
俺一般0.18A constant for 35min。基本上marker都转过去，偶尔有一丝还留在gel里
buffer就是普通的transfer buffer+甲醇. 滤纸用的也是biorad的8x13.5cm那种
, |
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A***g
发帖数: 191 | 8 下次会延长时间。
我一般也就是设定电压，但发现转膜过程中，电流会逐渐降低，会降到很低，就以为时
间延长没有什么用。
还有，再请教下，跟滤纸会不会也有关系呢，我用了Biorad的Extra thick blot paper
滤纸。 |
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s******y
发帖数: 220 | 9 打算买个C1000 Touch™ Thermal Cycler
biorad的， 不知道能否要到折扣呢？
有什么trick没？
谢谢啦～ |
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C*******e
发帖数: 4348 | 10 上这里问没用吧
你要跟local biorad representative 联系
还有时候有什么bundle sale你一下买好几个东西
会便宜
还有看你钱的来源
学校里的和政府的discount不一样 |
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s******y
发帖数: 220 | 11 请问readygel 和TGX gel有什么区别， 好像后者是prestain的， 可保存更久，除此还
有区别吗？
biorad的蛋白胶好吗？ 同价位其他公司的更好用吗？ 请推荐，谢谢！ |
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d****i
发帖数: 2346 | 12 买了BioRad的midi box，打算买midi gel。有人说梯度胶会跑歪。。。。。谢谢！ |
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s******r
发帖数: 1245 | 13 目前来看没什么问题，我们以前用的是abi家触摸版，烂得要死，换新机器的时
候本来看的是biorad非触摸多block的那个旧款，后来一报价一台比这两台都贵，就买
了这 |
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s******y
发帖数: 28562 | 14 谢谢！我们目前收到的报价里，BioRad T100的确是比其他款式（包括他们自己家的其
他款式）几乎便宜了一倍，所以让我特别觉得奇怪。 |
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s******c
发帖数: 331 | 16 哪里有新的biorad的PCR不到2000？我也去买 |
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s******y
发帖数: 28562 | 17 上半年我们刚买了一台，Biorad 带 Gradient的$2500， Life Technologies 的不带
gradient 的则只需要$1500 |
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s******y
发帖数: 28562 | 18 我们直接比较过。新型号的Biorad touch (旧型号不行）以及GE imager 可以达到
Femto 灵敏度没有问题。 |
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c******m
发帖数: 503 | 20 可能有机会回国biorad，不知道待遇，以后发展如何？有人了解吗？是不是不如药厂？ |
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h****u
发帖数: 618 | 21 需要买一台PCR 做 mRNA 和 microRNA expression. 以前一直都用 Applied biosystem
StepOnePlus™ PCR, 但是最近看到 Bio-Rad CFX96™ 不需要calibration
,但是StepOnePlus™ 是需要买calibration kit的。不知道哪个更好用呢？如果
两者性能相当，买 biorad 就一劳永逸了。
而且听sales 说， biorad 使用5个led 激发， steponeplus 只有一个蓝色led， 所以
做Multiplexing的话，是不是biorad 更好呢？ 而且应为多个LED，light path 也和
StepOnePlus™ PCR 不同，所以不用ROX 校准。真是这样吗？
另外在 biorad 上使用 taqman 的试剂会不会有问题呢？ 我看到Applied Biosystem
网站上有专门给BioRad CFX96™ 设计的试剂。
请大家指教。非常感谢！ |
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h****u
发帖数: 618 | 22 需要买一台PCR 做 mRNA 和 microRNA expression. 以前一直都用 Applied biosystem
StepOnePlus™ PCR, 但是最近看到 Bio-Rad CFX96™ 不需要calibration
,但是StepOnePlus™ 是需要买calibration kit的。不知道哪个更好用呢？如果
两者性能相当，买 biorad 就一劳永逸了。
而且听sales 说， biorad 使用5个led 激发， steponeplus 只有一个蓝色led， 所以
做Multiplexing的话，是不是biorad 更好呢？
另外在 biorad 上使用 taqman 的试剂会不会有问题呢？
请大家指教。非常感谢！ |
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j****x
发帖数: 1704 | 23 完全同意！
Biorad应该是性价比最好的，稳定性兼容性也不错。LC480使用超过2年之后问题接踵而
来，而且维护费用离奇的高，我们这LAMP UNIT接连坏了2次，维修报价直接让人吐血。
试剂耗材更不用说了，好在用的多，给打了非常大的折扣，但一般实验室如果不是当水
喝的话估计拿不到这个价格。板子我们后来用从另一个公司订制的，价格便宜一大半，
而且更好用。结果roche一听说我们要换板子，立马就表态可以match这个价格（之前怎
么谈都只同意给7折）。
其实实验室用过biorad的都觉得好，不过奇怪的是，一个非常重要的检测，只用用
LC480才能得到稳定的结果，biorad和ABI都不行（也许是相对老一点的机器的缘故），
所以老板就只认LC。当然，除了试剂耗材和维护费用，LC480也算得上好机器了
contract
括2台仪器加96well和384的探测头各一个（3年前的价格）。 |
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l**********1
发帖数: 5204 | 24 pls check a couple of years ago here similar post:
juzbox
2011-05-26 11:38:29
来自: 95.91.
4th floor
完全同意！
Biorad应该是性价比最好的，稳定性兼容性也不错。LC480使用超过2年之后问题接踵而
来，而且维护费用离奇的高，我们这LAMP UNIT接连坏了2次，维修报价直接让人吐血。
试剂耗材更不用说了，好在用的多，给打了非常大的折扣，但一般实验室如果不是当水
喝的话估计拿不到这个价格。板子我们后来用从另一个公司订制的，价格便宜一大半，
而且更好用。结果roche一听说我们要换板子，立马就表态可以match这个价格（之前怎
么谈都只同意给7折）。
其实实验室用过biorad的都觉得好，不过奇怪的是，一个非常重要的检测，只用用
LC480才能得到稳定的结果，biorad和ABI都不行（也许是相对老一点的机器的缘故），
所以老板就只认LC。当然，除了试剂耗材和维护费用，LC480也算得上好机器了
contract
括2台仪器加96well和384的探测头各一个（3年前的价格）。
c... 阅读全帖 |
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l*****g
发帖数: 556 | 25 That's a list of rumors, over couple hundreds about BioRad.
Rumors are usually more acurate than public press releases.
BioRad has about 50 chinese, they might be able to provide insight at
informal occasions. |
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g*********5
发帖数: 2533 | 26 biorad precast gel sucks!
should use invitrogen Bistris Gel, 2x expensive than biorad and good results
... |
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R****n
发帖数: 708 | 27 I used ABI 7300, Biorad CFX96 and Roche lightcycler 480.
Generally speaking they are all good for your purpose. I think Biorad CFX96
is better one among the three. |
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N***P
发帖数: 153 | 28 我是新手，诚心请教western达人：
15% Tris.HCl precast gel (Biorad),coomassie blue染色以显示所有蛋白。把15%胶
直接扫描，图像没有做任何photoshop调整。protein maker是Biorad prestained SDS-
PAGE standards, broad range, 用了8ul. 1 lane是recombinant human IGF-1; 2-4 lanes为tissue lysates.这块胶经过染色以后，一直保存在4度双蒸水里面，快10个月了。
1.能否说第2，3，4 lanes equal loading?
2.我的标准曲线不是很准，但凭大家的经验，每条lane里面，大概加了多少ug蛋白？
3.Lane 1我加了500ng recombinant human IGF-1 (7.4kd)，对应的应该是最下面那一
条带。但这条带染色很弱。500ng纯蛋白显示的带，经过coomassie blue染色以后，是
否很明显？ |
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B******o
发帖数: 496 | 29 正好三种机器都用过。俺的个人看法，Bio-Rad的最user friendly.机器的表现也不错
，可以用很多其他厂家的plate，印象中3年里基本没怎么出问题。ABI的就是试用了一
次，速度不如Roche和BioRad快，其他的因为时间短无法给意见。Roche lightcycler
480的总的来说还行，就是plate的限制比较多，现在我们基本是用Roche自己生产的。
研究所3年前一起买了3-4台，目前为止都出过比较大的问题，幸亏有service contract
，否则维修价格昂贵。
至于BioRad的型号，你得问问sales最新的是多少。价格和Roche差不多。大概45k包括2台仪器加96well和384的探测头各一个（3年前的价格）。 |
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j******n
发帖数: 941 | 30 我用过biorad的iq5 一般机器给的几个孔的std大于0.25都认为是重复性不好。我以前
出过一次类似的问题， 最早最早来这个实验室的时候出现的， 是因为最后加的那个酶
混合物， 做master solution的时候没混合彻底，因为那个是保存在甘油里面的，需要
额外多混合几次，然后加模板也要用pipetor上下混合5次以上
除此之外 我没出过类似的问题
试剂不是影响的关键，这种qPCR机器跟试剂技术早已烂大街了，我在biorad机器上几乎用过大部分公司的产品，一致性都是相当好的。
还有，不排除机器老化后，孔之间的温控不均一，不过这个可以通过调整样品位置来排查。 |
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s**u
发帖数: 9035 | 31 昨天下午，我做了一块，发现又有更加奇怪的现象发生，96 well Plate右边一半没有
加任何sample, 完全空白，竟然也会出现大量读数，而不是Ｎ／Ａ。
我们老板很生气，决定向Biorad公司交涉更换一台。要到下星期二上班后发email，把
最近一个星期的奇怪现象再次反映给Biorad |
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f********n
发帖数: 6465 | 32 发信人: squirrabbit (松鼠兔), 信区: Biology
标 题: 也问问bradford法测量蛋白浓度
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Oct 26 06:14:12 2011, 美东)
是每次都要做标准曲线吗？那也太麻烦了吧
我们实验室的做法：167ul的BioRad的bradford溶液 加833ul水，混好加1ul稀释的样品
，用空白的样品调零，595nm测得的读数，每0.06算1ug／ul。读数最好不低于0.1，不
高于0.6, 高了就稀释样品。
这个误差是不是很大啊？一直对这个protocol不放心，不过大家都是这么测的。
发信人: squirrabbit (松鼠兔), 信区: Biology
标 题: Re: 也问问bradford法测量蛋白浓度
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Oct 26 06:36:57 2011, 美东)
那做一次标准曲线是不是可以一直用啊？
我看biorad的instruction manual给出了bsa和IgG的标准曲线啊 |
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b******n
发帖数: 4225 | 33 1. 抗体的选择
对于国内的大多数实验室来讲，做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很
简单，买进口抗体捉襟见肘，买国产抗体得需要大无畏的勇气，对于我所在的兰州地区
的实验者而言，感触尤深。在 这五年的western blot实验历程里，我先后用过进口抗
体，进口抗体国内分装包装，国产抗体，质量良莠不齐。
进口抗体一般不会出现闪失：abcam品种全，质量过硬，但价高（3400元/100微升），
而且说是100微升，但至多能吸出来90微升；Sigma的 价最贵；比较有性价比的是CST的
抗体，现在好像是2200元/100微升，我前后用过二十几种， 1:1000的稀释比下，还没
有失过手，100微升通常能完成所有的免疫组化和western blot实验，还有一个优点是
通常量比100微升多出来10微升，唯一的不足是CST的品种实在不多。Santa的多克隆抗
体质量可以，但是选用 Santa的单抗还是有风险，估计这也是业界共识了吧。
进口抗体国内分装包装我也用过不少，呵呵，毕竟是穷人（420元/100微升），大概好
抗体的比例约为50%，如果能做出来，也存在一个问题，就是... 阅读全帖 |
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i****g
发帖数: 3896 | 34 写得比较有意思，但是不太实用，可能实验条件相差太大。precast gel比自己制的gel
效果要好很多，结果也容易重复。antibody要看运气的，呵呵。
1. 抗体的选择
对于国内的大多数实验室来讲，做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很
简单，买进口抗体捉襟见肘，买国产抗体得需要大无畏的勇气，对于我所在的兰州地区
的实验者而言，感触尤深。在 这五年的western blot实验历程里，我先后用过进口抗
体，进口抗体国内分装包装，国产抗体，质量良莠不齐。
进口抗体一般不会出现闪失：abcam品种全，质量过硬，但价高（3400元/100微升），
而且说是100微升，但至多能吸出来90微升；Sigma的 价最贵；比较有性价比的是CST的
抗体，现在好像是2200元/100微升，我前后用过二十几种， 1:1000的稀释比下，还没
有失过手，100微升通常能完成所有的免疫组化和western blot实验，还有一个优点是
通常量比100微升多出来10微升，唯一的不足是CST的品种实在不多。Santa的多克隆抗
体质量可以，但是选用 Santa的单抗还是有风险，估计这... 阅读全帖 |
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l******g
发帖数: 1145 | 35 用过的ABI和eppendorf的都不错。
Biorad没用过，听说软件不易上手。貌似Biorad最近要推新一代的qpcr仪，真正意义上
的精确到copy number，可以关注一下。 |
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D*a
发帖数: 6830 | 36 我们用biorad 4-20梯度，0.2 pvdf，和 biorad那套转膜的叫transblot，跑10kDa以下
的看得挺清楚的。 |
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a******a
发帖数: 283 | 39 Here is a technology question. I know it should be possible to improve the
result and would like to hear some more suggestions.
Basically we are trying to push the limit of detection to the level of 10e4
or even 10e3, for viral RNA isolated from animal blood samples, for
pharmacokinetic study.
Our samples contain mostly carrier RNA with viral RNA of interest.
And with SBYR or TaqMan, we can stably detect 200-300 copies per well (of 96
-well setting), that translates into 10e5 copies/ml with our ... 阅读全帖 |
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w********h
发帖数: 12367 | 40 【 以下文字转载自 Biology 讨论区 】
发信人: bulletin (bulletin), 信区: Biology
标 题: 穷人的劳斯莱斯——五年western经验谈（转）
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Mar 2 23:29:05 2012, 美东)
1. 抗体的选择
对于国内的大多数实验室来讲，做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很
简单，买进口抗体捉襟见肘，买国产抗体得需要大无畏的勇气，对于我所在的兰州地区
的实验者而言，感触尤深。在 这五年的western blot实验历程里，我先后用过进口抗
体，进口抗体国内分装包装，国产抗体，质量良莠不齐。
进口抗体一般不会出现闪失：abcam品种全，质量过硬，但价高（3400元/100微升），
而且说是100微升，但至多能吸出来90微升；Sigma的 价最贵；比较有性价比的是CST的
抗体，现在好像是2200元/100微升，我前后用过二十几种， 1:1000的稀释比下，还没
有失过手，100微升通常能完成所有的免疫组化和western blot实验，还有一个优点是
通常量比100微升多出来10... 阅读全帖 |
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l*******1
发帖数: 16217 | 41 PCR仪器全是ABI，biorad的，国产的还不行，
大型NMR都德国的，
电镜美国的，
中国的科研仪器就是能生产离心机这一类的，连fluoresent microscope, confocal
microscope 都很少，是Olympus |
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发帖数: 1 | 42 ddPCR比传统的real time PCR要好点，就是调参数和底峰杂峰方面
但是对起始RNA样品的要求并没有降低，医院那个水平，那么乱，怎么可能弄得的好的
起始检测样本
再说如果用biorad的试剂盒，麻痹tg会被搞破产的，那么多病人，怎么买得起 |
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发帖数: 1 | 43 钱啊，山寨试剂盒不知道做ddPCR效果怎么样，从来没接触过山寨的，如果用bioRAD试
剂盒，那得多少钱啊。还有real time PCR仪，那得多少钱啊，小地方根本没有，武汉
也不是白菜那样多，小地方如何送样？背着液氮罐跑吗？这个是RNA样品，不是DNA |
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F*****s
发帖数: 844 | 44 你个人买biorad的产品？what for? |
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r*********g
发帖数: 1160 | 45 我和几个别的课题组share一个大实验室，有一台5年前Biorad买得realtime PCR最近有
问题了，给公司打电话，他们说不做这个model了，所以不管维修了。
因为是我组里一个postdoc最后做得几组试验发现有问题了，我想负责把它修好。不知
道除了Biosurplus还有哪几个专门回收旧仪器翻修的公司所以上来求助？
谢谢大家。 |
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a********k
发帖数: 2273 | 46 给research用的东西关键不是价格。
几个做得大的像thermo,Life,Biorad,Qiagen每个产品都是80%以上的毛利。至少我在
Life见过的几十个里面很少有低于80%的 |
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E*********r
发帖数: 4984 | 47 Fluidigm 恐怕要把生产基地从新加坡转到上海了。 他们东西不错，但是和其它公司相
比没有特别独特的技术，Microfluidics现在有几家都做得蛮好， Digital PCR Biorad
非常牛。 测序领域Illumina和Ion Torrent是领头羊。 连Singulex这种公司都是独特
的技术。 |
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c********s
发帖数: 236 | 48 生物博后转到Biorad或是ThermoFisher研发岗位还算是同领域的研究工作么？
或者是转到期刊的专职编辑或副主编还算么？
希望有经验的说说 |
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c********s
发帖数: 236 | 49 生物博后转到Biorad或是ThermoFisher研发岗位还算是同领域的研究工作么？
或者是转到期刊的副主编还算么？
希望有经验的说说
Thanks |
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b****a
发帖数: 37 | 50 想在BOSTON地区找一个实验室, 免费安装一台荧光化学发光成像仪, 此仪器比较适合
做WESTERN BLOTTING等实验的结果分析. 唯一条件: 仪器能被频繁使用. 如果您已经有
BIORAD或其他公司的仪器, 作为对比效果会更好.
免费使用期限：２个月至 永久（面谈）． 无需您反馈使用的具体信息（有反馈更好
）， 除您同意外，不会带其他客户来参观贵实验室．
需要资料的话，可站内联系，或发邮件到b****[email protected]. |
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