s*****b
发帖数: 4115 | 1 【 以下文字转载自 Auto_Fans 俱乐部 】
发信人: sdyccyb (放手一搏), 信区: Auto_Fans
标 题: 求推荐OBD II 软件和cable P0021 IVT Solenoid
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jun 11 17:56:21 2013, 美东)
以前在costco买的20刀的ODB II Scanner不太给力，扫描不到Nissan的P0021，只好去
Autozone读码。如果能找到合适的OBD II Cable和强大的软件，应该能实现一样的功能
吧。Google了半天感觉眼花缭乱，不知道有没有TX能推荐一下？
Nissan的P0021还是有点头疼的，IVT Solenoid, CAM Sensor, Crankshaft Sensor，各
处connector，Gasket/Seal,timing chain都有可能。随便一个原厂sensor都要一两百
刀，没把握的话不敢乱砸钱进去。现在最怀疑由于某个gasket/seal坏掉导致油压过低
，或者12万迈里程的IVT Solenoid坏掉。 |
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r**********e
发帖数: 587 | 2 DNA template做in vitro transcription，做完后，用bio-spin column去除single
nucleotide；
我这里是要比较SNP对于IVT的影响
那么接下来如何定量呢？用nanodrop定量，可以吗？
RNA浓度很高（IVT一般都产生大量RNA），nanodrop定量大概500ng/ul
总担心nanodrop不够accurate；但对于这么大量的IVT RNA， 难道用qPCR呢？我们做一
般total RNA 的qPCR，是要gapdh这样的control的，但IVT RNA，就一种sequence。。
。 |
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g****i
发帖数: 2269 | 3 看来数我弱啊。以前的医院就是会也不让做的，科里连supply都没有，specialize的很
厉害，抽血不是ivt就是plebotomy。start iv和central line dressing change完全是
ivt
现在的医院如果需要stick是plebotomy，rn允许start iv,但是大家都叫ivt，不管是不
是hard stick，没有时间啊。我来这里至少学会了draw blood from central line,
central line dressing change。所以打算跟着ivt练练start iv skill. |
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k*****6
发帖数: 39 | 4 请教一下这一段里的英文名词都指的是什么：
“看来数我弱啊。以前的医院就是会也不让做的，科里连supply都没有，specialize的很
厉害，抽血不是ivt就是plebotomy。start iv和central line dressing change完全是
ivt
现在的医院如果需要stick是plebotomy，rn允许start iv,但是大家都叫ivt，不管是不
是hard stick，没有时间啊。我来这里至少学会了draw blood from central line,
central line dressing change。所以打算跟着ivt练练start iv skill.”
谢谢！ |
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g****i
发帖数: 2269 | 5 薪水不知道，但是也不轻松。page不停的响，尤其是cardiac的都是紧急的，有时候
page了不见人来，就直接去他们的office找别人来start iv。所以我们早晨交班是iv是
交的很清楚的，什么gauge，在哪里，是否flush。如果iv不work，第一件事就是赶紧
page ivt，get a new iv before emergency happens. 那时有个中国人在ivt，看见她
总是在忙，page响个不停。我曾经让她问过ivt的director，因为我想跟她练个几个小
时,结果回复是“只能在ivt office的dummy上练，不能扎病人,她付不了那个责任，因
为医院不允许”
以上这些都是在GA的那个医院的事情。那个医院的policy就是floor nurse不允许start iv 和stick 病人的
障, |
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s*****b
发帖数: 4115 | 6 Nissan VQ35DE，2004，12万迈
P0021困扰了近半年，最近终于完全搞清楚，写下来供人参考吧。
三个体会：1.别乱扔钱买新零件，2.别图省钱省事引入新问题，新问题会把本来的问题
给遮住，把简单的问题复杂化，3.O Ring这些小东西尽量用原厂的，花几十块钱换个O
Ring也有一腚的道理。
P0021字面的查询结果是
A P0021 DTC trouble code may be caused by one or more of the following:
Incorrect camshaft timing
Wiring problems (harness/wiring) in intake timing control valve control
solenoid system
Continuous oil flow to VCT piston chamber
Failed timing valve control solenoid (stuck open)
如果去车铺，不懂行的上来就会让你换CPS/Crankshaft Sensor/IVT Solenoid，每个零... 阅读全帖 |
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r**********e
发帖数: 587 | 7 想对大概200bp的oligo template做in vitro transcription
我的目的就是，对oligo进行突变，比如一个A，一个C， 然后做IVT， 然后就简单的
nanodrop测量RNA yield；来观察A/C对transcription的影响
protocol上说对于short template，IVT可能有点困难。我想请问为啥呢？因为
polymerase很大，polymerase initiation需要一定的空间距离？而200bp太短？
我的目标并不是追求max yield，我的目标是比较A和C的yield区别。但是，因为200bp
长度太短，我不知道用200bp做IVT比较yield，是否严谨？ |
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y**m
发帖数: 1049 | 8 有时间还行,跟玩似的.忙的时候就不行了.还是有IVT或者phlebotomy好.我现在干的两家
一家有IVT,但是不久前她们开始做PICC,所以也帮不上忙了.另一家有phlebotomy,基本
上还是随叫随到的,忙的时候就显的出来有她们的好处了.可惜除了lab她们其他什么也
不做.你那里很好啊,我是从来都没想过central line dressing change都可以叫IVT.叫
了也是招白眼,人家不会来的. |
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s*****b
发帖数: 4115 | 9 Nissan VQ35DE，2004，12万迈
P0021困扰了近半年，最近终于完全搞清楚，写下来供人参考吧。
三个体会：1.别乱扔钱买新零件，2.别图省钱省事引入新问题，新问题会把本来的问题
给遮住，把简单的问题复杂化，3.O Ring这些小东西尽量用原厂的，花几十块钱换个O
Ring也有一腚的道理。
P0021字面的查询结果是
A P0021 DTC trouble code may be caused by one or more of the following:
Incorrect camshaft timing
Wiring problems (harness/wiring) in intake timing control valve control
solenoid system
Continuous oil flow to VCT piston chamber
Failed timing valve control solenoid (stuck open)
如果去车铺，不懂行的上来就会让你换CPS/Crankshaft Sensor/IVT Solenoid，每个零... 阅读全帖 |
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g***3
发帖数: 471 | 10 这个报告里，比如icv 150，，它旁有intervalle de confiance 95% 指数是136 -
153 TRES SUPRIEURE IRP 134 intervalle de confiance 119 -137 TRES
SUPERIEURE
IMT 120 intervalle 101 122 FORT IVT 109 intervalle 98 - 117 MOYEN
医生解释是说，他就ivt 和同龄孩子差不多，其他都很超，尤其前2项
但是我们觉对认为他就是比较好奇，还有哥哥姐姐的关系
分。 |
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M****e
发帖数: 70 | 11 come on, show time, folks. so should we all email assassin back and corrupt
his mail box? i won't discuss all of the questions listed by assasin. actually,
to read papers on Cell is always headache, particularly manuscripts by
biochemistry/cell biology people.
Fig2A shows that purified separase can utilize in vitro translated(IVT) hSCC1
as well as endogenous hSCC1 as substrate in an in vitro cleavage assay. I think
the IVT sample (in RRL?) should be purified first (avoid incomplete translation), |
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g****i
发帖数: 2269 | 12 我倒是觉得是医院节省开支specialize的计策，而且他们ivt肯定比一般的护士技术好
，既节省材料，并发症也少，病人complain也少。以前的医院ivt不仅start iv，还同
时抽血（start iv的同时抽，如果已经有iv，就是phlebotomy抽），change central
line dressing, caps, d/c central line, making daily rounds to see which pt's
iv needs to be rotated (more than 3 days).
面. |
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T**********e
发帖数: 29576 | 14
IVT和surrogate mother以后就能遗传了。 |
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l****n
发帖数: 283 | 15 pm state and zip, thx!
注意，不要ivt-6143blk,那是不同款。 |
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l****n
发帖数: 283 | 16 pm state and zip, thx!
注意，不要ivt-6143blk,那是不同款。 |
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c*****h
发帖数: 14923 | 17 application fee，就是100 per person，除非你加其他服务比如IVT
申请成功后，GE有效期是5年 |
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Y****a
发帖数: 796 | 18 global entry还有个$129的IVT service 免不掉的吧 |
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z***c
发帖数: 2959 | 20 本科是本科，你不要拿研究生院的名气来套
大部分父母，考虑的是孩子本科毕业去工作，
人家USNews排名也是从这角度出发的
IVT League有好几个研究生院都不怎么样
但人本科毕业生找工作的优势就在那里，人重
点发展的也就是本科 |
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f*******e
发帖数: 354 | 21 求教：
手里研究的A蛋白影响了B蛋白的蛋白水平，但不影响mrna水平，本想做降解的，MG132
虽然可以恢复一部分，但是就是内源性降解曲线（CHX）没有明显差异。现在想要不要
转向翻译水平，但是没有full length 的mrna，只有coding区，因为也不知道是否在非
编码区的调控，所以单独试coding区意义不大。
所以如下假设，不知道有没有可能。
先将原核表达纯化的蛋白（如GST和GST-A）加入到IVT系统中，再加入相同ug的细胞
total mRNA,翻译一定时间后Western检测B蛋白，不知道这样是否可能，有没有达人做
过，一般都是特定的mrna，这样总rna会不会目的基因拷贝数太少而检测不到。
非常感谢！ |
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m******u
发帖数: 12400 | 23 200nt 不算短，可以比较好转录。但也要看你需要。Nanodrop定量不准，因为free
nucleotide干扰，需要先除去。简单沉淀不能去除free nucleotide。要用柱子。
IVT另一个问题是不纯。短的模板会产生不依赖模板的序列，这倒不简单是因为
polymerase太大的缘故。有时polymerase会bend回来继续转绿，形成回文的转录产物。
长的产物会不能合成到底，产生短的不完整产物，这个也很麻烦。 |
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r**********e
发帖数: 587 | 24 很感激
我做了200nt oligo为template的IVT，压根不work
而PCR product作为template还可以
我不知道是我技术的问题，还是oligo本来就很难work呢？ |
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m******u
发帖数: 12400 | 25 RNA polymerase一般需要双链template---assume大家用的是T7或SP6的polymerase。你
200nt template指的是单链模板么？至少promoter区要双链的。
而PCR产物则是双链的，你的问题会不会是这个原因。
发信人: reallyloveme (ray), 信区: Biology
标 题: Re: in vitro transcription for short template
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jun 20 12:46:24 2017, 美东)
很感激
我做了200nt oligo为template的IVT，压根不work
而PCR product作为template还可以
我不知道是我技术的问题，还是oligo本来就很难work呢？ |
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v********a
发帖数: 646 | 27 我做过70个碱基的ivt，觉得产量还行。
但是产物必须Urea PAGE切胶纯化，用Qubit HS DNA kit 定量。 |
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g****i
发帖数: 2269 | 28 I assume your "国外" means American.
输液扎针: sorry, I don't know how to draw blood and only started IV for 12
pateints so far and failed about 6. No problems about giving meds via IV.
The first hospital I worked in Gerogia: Phlebotomy team is in charge of all
blood draws by sticks. IV team is in charge of all IV starts, central line
lab draw and dressing change and removal. I did not learn any IV skills in
that hospital. Even you know how to draw blood or start IV, the policy says
NO. We even don't ... 阅读全帖 |
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g****i
发帖数: 2269 | 29 是的，我以前的医院就是不允许，IV team 和PHlebotomy全包了，科里连抽血和start
iv的东西都没有，所以你就是会也没办法。现在的医院IV TEAM说是帮忙，但是我们科
忙的都几乎没人自己start iv，都是叫ivt，而且大部分病人都hard stick。
phlebotomy管stick，我们没有butterfly needle and 那种真空tube的adapter，我们
只抽picc and central line。 |
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g****i
发帖数: 2269 | 30 我不是找什么借口，我以前在GA的医院就是不允许的，就是会也没有supply，我们科里
所有new grad都不会这些skill，因为毕业后从来没有练过。所以我直到来了dallas才
见到过iv start kit。以前的医院非常的specialize的，护士拔所有的chest tube。
tele 每天都是5-6个病人，还要自己pull shealth(post heart cath）。
现在的医院可以自己start iv，但是大家忙的都是叫ivt，lab draw by stick是
phlebotomy的工作，我们连针和vaccum tube的adapter都没有。
我不是为了自己不会这些skill找借口，而是为了说明不同医院的体制问题，让大家看
看都有什么样的体制。
你也不至于用“不太勤奋”来讽刺人吧。
IV |
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g****i
发帖数: 2269 | 31 我以前在GA的医院IVT记录很全的，而且他们负责所有的dressing and cap change，
blood draw and pull PICC.现在这个科很混乱，经常知道做了某个procedure，但是在
chart里就是找不到记录，picc就是一个例子，orientation也不全面，新人们都是稀里
糊涂的，有一次交班一个护士说她换了dressing，我问cap是否换了,她说不知道cap也
需要换，她是new grad工作一年了，看来她这一年就没换过。
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