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Biology版 - 困惑,knock down在蛋白水平work,但qpcr检测不到差别
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话题: shrna话题: qpcr话题: knock话题: down话题: pcr
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w*******g
发帖数: 16
1
用shRNA来knock down一个基因。用相同数目的细胞做western blot后,能明显的看到
shRNA降低了蛋白的表达量,同样的细胞用来做taqman realtime pcr却看不到处理组和
对照组的区别。pcr产物跑电泳检测确实pcr产物都是单一条带。挺困惑的,请各位大牛支招啊
,多谢
a***e
发帖数: 1010
2
doesn't your shRNA inhibit translation, but not trigger slicing?
a******f
发帖数: 23
3
co-ask.siRNA到底在什么level knoxk down gene expression 啊?
b***g
发帖数: 516
4
你的qPCR的引物在不同的exon么
我是说会不会是genomic contamination
w*******g
发帖数: 16
5
谢谢各位的回复。probe是在exon和intron之间,不会是genomic contamination
r****r
发帖数: 379
6
这不奇怪,我身边很多人发现类似现象。shrna和sirna机制上很可能有很大的不同,至
少现在看来shrna翻译抑制常发生。

牛支招啊

【在 w*******g 的大作中提到】
: 用shRNA来knock down一个基因。用相同数目的细胞做western blot后,能明显的看到
: shRNA降低了蛋白的表达量,同样的细胞用来做taqman realtime pcr却看不到处理组和
: 对照组的区别。pcr产物跑电泳检测确实pcr产物都是单一条带。挺困惑的,请各位大牛支招啊
: ,多谢

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