v*******8
发帖数: 12 | 1 希望在体外培养的人的细胞内插入一段基因，使其表达由某特定promoter来控制，有什
么办法吗？
谁给科普一下，多谢了！ |
o********r
发帖数: 775 | 2 homologous recombination + positive/negative selection?
不过俺N年没做过这个了。。。 |
j******i
发帖数: 939 | |
v*******8
发帖数: 12 | 4 我需要这段基因由细胞内某endogenous promoter来调控，所以应该要插入在特定位置
不是简单的recombination
【在 j******i 的大作中提到】
: 最简单的就是用lentivirus了吧
|
j******i
发帖数: 939 | 5 如果你需要在特定位点插入的话, 可以试试用Zinc finger nuclease：在特定位点造成
DNA double strand break, 然后利用同源重组把目的片断整合进去。sigma有一些ZFN
的服务，不妨看看。http://www.sigmaaldrich.com/life-science/zinc-finger-nuclease-technology/cell-and-cell-based-assays/cces.html |
c******r
发帖数: 3778 | 6 好像tissue culture里面可以knockin，但是成功率非常低，要筛无数的clones。。。 |
