G***G
发帖数: 16778 | 1 问几个问题
同一个bead里面的毛毛都是一样的。
不同bead的primer都是一样的吗？这个primer是什么时候输入进去的？ |
G***G
发帖数: 16778 | 2 顶一下
【在 G***G 的大作中提到】
: 问几个问题
: 同一个bead里面的毛毛都是一样的。
: 不同bead的primer都是一样的吗？这个primer是什么时候输入进去的？
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T**********t
发帖数: 1604 | 3 汗一个毛毛。。。
除非你做multiplexing，否则应该是universal primer。primer难道不是在测序反应的
mix里加的么。。。
【在 G***G 的大作中提到】
: 问几个问题
: 同一个bead里面的毛毛都是一样的。
: 不同bead的primer都是一样的吗？这个primer是什么时候输入进去的？
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G***G
发帖数: 16778 | 4 是的。为什么不同的序列，都用universal primer？
这样测得的序列显然不准。
【在 T**********t 的大作中提到】
: 汗一个毛毛。。。
: 除非你做multiplexing，否则应该是universal primer。primer难道不是在测序反应的
: mix里加的么。。。
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p******n
发帖数: 874 | 5 Why it's not accurate? Either primer won't be seqeunced or they can be
removed easily. |
T**********t
发帖数: 1604 | 6 因为样品处理的过程中在每个待测片段的两端都加上了universal adapter序列，所以
能用universal primer。你先了解一下NGS测序的原理吧，不要轻易下结论。。。
NGS测序的一个卖点就是高通量，不用universal primer的话，高通量怎么能实现呢？
【在 G***G 的大作中提到】
: 是的。为什么不同的序列，都用universal primer？
: 这样测得的序列显然不准。
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G***G
发帖数: 16778 | 7 I got it.
if adapter is added, there will be universal primer.
yesterday I read pyrosequencing which doesn't use adapter.
【在 T**********t 的大作中提到】
: 因为样品处理的过程中在每个待测片段的两端都加上了universal adapter序列，所以
: 能用universal primer。你先了解一下NGS测序的原理吧，不要轻易下结论。。。
: NGS测序的一个卖点就是高通量，不用universal primer的话，高通量怎么能实现呢？
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T**********t
发帖数: 1604 | 8 也许只是人家没有具体的提到而已，不代表没有用adapter。
【在 G***G 的大作中提到】
: I got it.
: if adapter is added, there will be universal primer.
: yesterday I read pyrosequencing which doesn't use adapter.
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n****g
发帖数: 1063 | |
X***n
发帖数: 366 | 10 同一个bead上面得毛毛都是一样的，emulsion PCR产物。
【在 G***G 的大作中提到】
: 问几个问题
: 同一个bead里面的毛毛都是一样的。
: 不同bead的primer都是一样的吗？这个primer是什么时候输入进去的？
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f**********e
发帖数: 1994 | 11 ePCR 会有 10-20% 的机会有杂毛。
【在 X***n 的大作中提到】
: 同一个bead上面得毛毛都是一样的，emulsion PCR产物。
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