h**********r
发帖数: 671 | 1 没有买现成的E.coli的lysis buffer.网上看了看，多种多样的。大家给个自己用的比
较好的recipe吧。裂解完之后测酶活的。多谢了！
包子伺候。 |
m******5
发帖数: 1383 | 2 50mM Tris
300 mM NACL
5mM MgCL2 (这个看你的酶的性质)
2mM EGTA（同样，如果是Ca依赖的不要加）
10% Glycerel
0.5 Triton X-100
这个比较万精油 |
h**********r
发帖数: 671 | 3 EGTA换成EDTA可以不？实验室没有EGTA
要加lysozyme不？
另外怎么处理？37度30min?
多谢！ |
s******s
发帖数: 13035 | 4 EGTA和EDTA不一样，好像Mg和Ca的问题
【在 h**********r 的大作中提到】
: EGTA换成EDTA可以不？实验室没有EGTA
: 要加lysozyme不？
: 另外怎么处理？37度30min?
: 多谢！
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a*****y
发帖数: 269 | 5 You can use 1% beta-octylthioglucoside (OTG) in PBS.
No enzyme or sonication is needed.
OTG in PBS does not seem to provide quite as effective commercial protein
extraction (for example, B-PER), but it will be good enough for most
applications. |
s********n
发帖数: 2939 | 6 BugBuster + Lysozyme + Benzonase + protein inhibitor cocktail |
h**********r
发帖数: 671 | 7 老大，你这都是有钱人的recipe。包子给了muhe1985， shakuras， alvinpy
smartkevin。虽然不是特满意：（ |
