w******u
发帖数: 17 | 1 蛋白solve在8M urea,
最后试过用1M imidazole, 1M imidazole+50mM EDTA,大部分蛋白还是在beads上。
估计蛋白stick在bead matrix上，
大家有什么好的办法解决这个问题？ 谢谢！ |
d******1
发帖数: 709 | |
s******y
发帖数: 28562 | 3 对。
【在 d******1 的大作中提到】
: 8M urea+1M imidazole
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w********r
发帖数: 1431 | |
i***l
发帖数: 1656 | 5 or guanidine hcl
【在 d******1 的大作中提到】
: 8M urea+1M imidazole
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f*****e
发帖数: 133 | 6 是Ni-NTA beads?这个不能加EDTA的吧？
【在 w******u 的大作中提到】
: 蛋白solve在8M urea,
: 最后试过用1M imidazole, 1M imidazole+50mM EDTA,大部分蛋白还是在beads上。
: 估计蛋白stick在bead matrix上，
: 大家有什么好的办法解决这个问题？ 谢谢！
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b******y
发帖数: 627 | 7 Yes, indeed.
【在 s******y 的大作中提到】
: 对。
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k******0
发帖数: 1073 | 8 上样时不能有EDTA，洗脱时加EDTA把Ni跟蛋白质一起洗脱下来。用后柱子需要recharge。
【在 f*****e 的大作中提到】
: 是Ni-NTA beads?这个不能加EDTA的吧？
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w********e
发帖数: 2113 | |
