c****1 发帖数: 1095 | 1 用慢病毒感染海马。目标CA1。
在有的切片上可以在CA1看到注射的痕迹,说明target到正确的位置。
但是,发现感染的区域大部分在cortex和海马交界的地方(红色是细胞核的DAPI染色)
。还有别的老鼠,感染的区域在DG和CA1之间的区域。我觉得,这是因为注射的速度不
够慢,或者注射的体积太大(1uL),导致病毒漏出去了,感染了覆盖在海马表面的包
膜,也感染了少数cortex的细胞。
老板固执的认为,那些感染的区域是海马的axon bundle。我说,都没有看到几个海马
的neuron被感染,他们的axon怎么会那么亮。他说,需要染色才能看到。他还说,要我
搞清楚那些被感染的区域究竟是什么机构,要证据。我无语。
请教下有经验的朋友。你们碰到这种情况么?这些被感染的,是不是结缔组织?
多谢! |
b*****n 发帖数: 55 | 2 Can you put one more image obtained from the same section at a lower
magnification, please? |
c****1 发帖数: 1095 | 3 Sorry, this is the lowest magnification. Objective is 4X.
【在 b*****n 的大作中提到】 : Can you put one more image obtained from the same section at a lower : magnification, please?
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c****1 发帖数: 1095 | 4 Maybe this one is better?
【在 b*****n 的大作中提到】 : Can you put one more image obtained from the same section at a lower : magnification, please?
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b*****n 发帖数: 55 | 5 你可能指的是白质。看起来你的病毒主要是在Corpus Collosum内,不知对侧有没有注
射及感染。 |
h******y 发帖数: 351 | 6 你的感觉是对的。GFP所在的区域是Corpus Collosum。
注射的时候定位应该比CA1更深入一点,然后向上稍微收一下needle,停几分钟,再注
射。
上病毒前先用染料多练练手。
【在 c****1 的大作中提到】 : 用慢病毒感染海马。目标CA1。 : 在有的切片上可以在CA1看到注射的痕迹,说明target到正确的位置。 : 但是,发现感染的区域大部分在cortex和海马交界的地方(红色是细胞核的DAPI染色) : 。还有别的老鼠,感染的区域在DG和CA1之间的区域。我觉得,这是因为注射的速度不 : 够慢,或者注射的体积太大(1uL),导致病毒漏出去了,感染了覆盖在海马表面的包 : 膜,也感染了少数cortex的细胞。 : 老板固执的认为,那些感染的区域是海马的axon bundle。我说,都没有看到几个海马 : 的neuron被感染,他们的axon怎么会那么亮。他说,需要染色才能看到。他还说,要我 : 搞清楚那些被感染的区域究竟是什么机构,要证据。我无语。 : 请教下有经验的朋友。你们碰到这种情况么?这些被感染的,是不是结缔组织?
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c****1 发帖数: 1095 | 7 多谢!
请问你注射的速度是多少?或者,1ul的病毒,几分钟内注射完?
我一般是大概2分钟注射完,然后再等8分钟拔针。
【在 h******y 的大作中提到】 : 你的感觉是对的。GFP所在的区域是Corpus Collosum。 : 注射的时候定位应该比CA1更深入一点,然后向上稍微收一下needle,停几分钟,再注 : 射。 : 上病毒前先用染料多练练手。
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