g******o
发帖数: 96 | 1 target protein可以被上游kinase磷酸化。serine突变成aspartic acid有表型，可是
serine突变成alanine没有表型。reviewer认为这个位点在正常生理情况下不怎么重要
，并要求解释原因。我的解释是这个位点在in vivo 被高度调控，可能有phosphate不
停的去磷酸化；也可能只有在特定的条件下才被磷酸化。
有人知道有这样的例子吗？只有D mutation 有表型而A mutation 没有表型的。
谢谢！ |
l****y
发帖数: 398 | 2 这种情况不少， 蛋白一般不是被完全被磷酸化的，大概10-20%吧， SD mutant放大了
磷酸化的效应，所以reviewer是有道理的； 你的解释也很有道理，再来点redundancy,
secondary sites...
reviewer买不买就只有听天由命了。
【在 g******o 的大作中提到】
: target protein可以被上游kinase磷酸化。serine突变成aspartic acid有表型，可是
: serine突变成alanine没有表型。reviewer认为这个位点在正常生理情况下不怎么重要
: ，并要求解释原因。我的解释是这个位点在in vivo 被高度调控，可能有phosphate不
: 停的去磷酸化；也可能只有在特定的条件下才被磷酸化。
: 有人知道有这样的例子吗？只有D mutation 有表型而A mutation 没有表型的。
: 谢谢！
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g******o
发帖数: 96 | 3 多谢回复！in vivo磷酸化比例确实很小，也有别的位点影响。不过只有这个site S-D
表型最强。能给个具体例子吗？ |
e****s
发帖数: 1125 | 4 不知道是我没理解对，还是怎样。
根据你说的，D Mutant有表型，A Mutant没有，不恰恰表示Ser是一个重要的磷酸化位
点吗？D模拟该底物磷酸化以后的状态。
不知道所谓正常生理情况下不怎么重要的依据是什么？不知道Reviewer凭什么这样认为
的。
【在 g******o 的大作中提到】
: target protein可以被上游kinase磷酸化。serine突变成aspartic acid有表型，可是
: serine突变成alanine没有表型。reviewer认为这个位点在正常生理情况下不怎么重要
: ，并要求解释原因。我的解释是这个位点在in vivo 被高度调控，可能有phosphate不
: 停的去磷酸化；也可能只有在特定的条件下才被磷酸化。
: 有人知道有这样的例子吗？只有D mutation 有表型而A mutation 没有表型的。
: 谢谢！
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g******o
发帖数: 96 | 5 这个protein S-D 蛋白变的stable，降解慢。按道理来讲S-A应该降解的快才对，可是
和wt没什么区别。 互补实验也是这样D mutation有表型，A mutation和wt一样。 |
s********r
发帖数: 312 | 6 是蛋白质本身biochemistry的表型，还是建立的细胞系这种情况下的表型？n n[发自未
名空间iPhone版] |
g******o
发帖数: 96 | 7 biochemistry和细胞系（KO cell line rescue）都是一样的，只有D有表型。 |
s********r
发帖数: 312 | 8 可能跟p53一样，phosphorylation对activity影响不大，只影响stability n[发自未名
空间iPhone版] |
p*****c
发帖数: 116 | 9 跟你用的细胞株有关，有些肿瘤细胞内kinase活性超强，WT transfection其实自动被
磷酸化变成D mut状态。 |
p*****e
发帖数: 93 | 10 可能表达量太高了，所以S-A 没表型。
【在 g******o 的大作中提到】
: target protein可以被上游kinase磷酸化。serine突变成aspartic acid有表型，可是
: serine突变成alanine没有表型。reviewer认为这个位点在正常生理情况下不怎么重要
: ，并要求解释原因。我的解释是这个位点在in vivo 被高度调控，可能有phosphate不
: 停的去磷酸化；也可能只有在特定的条件下才被磷酸化。
: 有人知道有这样的例子吗？只有D mutation 有表型而A mutation 没有表型的。
: 谢谢！
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