m********2
发帖数: 317 | 1 有个疑问，现在用的高保真聚合酶为什么能高保真？
是proof reading 的功能很强吗》 |
m********2
发帖数: 317 | 2 有个疑问，现在用的高保真聚合酶为什么能高保真？
是proof reading 的功能很强吗》 |
h*******0
发帖数: 48 | |
s******s
发帖数: 13035 | 4 对啊
【在 m********2 的大作中提到】
: 有个疑问，现在用的高保真聚合酶为什么能高保真？
: 是proof reading 的功能很强吗》
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s******s
发帖数: 13035 | 5 有这样的实验室, 为了省钱. 其实做出来测序部队, 更费钱费时间.
【在 h*******0 的大作中提到】
: 同问，看有些人克隆是直接用taq酶做
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z********4
发帖数: 701 | 6 有没有proof reading功能对保真性影响很大，但是活性中心本身也是一个因素，不同
来源的DNA聚合酶活性中心差异导致的保真性差别也可以是量级的。不过商业化的PCR用
酶基本都是复制型DNA聚合酶，即使没有校正功能保真性也是很高的，Taq在标准条件下
也是4－5万个碱基里面出个突变，用来clone一般够了，多挑几个克隆只要运气不是太
差应该没问题。 |
s******y
发帖数: 28562 | 7 一个最简单的高保真酶的机理就是一个双向酶，既能加一个碱基也能切掉一个碱基。
但是往后退切碱基的活性取决那个碱基对是否是正确的配对，如果是正确的配对，那么
后退切的效率很低，如果是不正确的配对，切的效率就很高。
通过这个简单的机理就能实现高保真。比方说pfu就是这种机理。
【在 m********2 的大作中提到】
: 有个疑问，现在用的高保真聚合酶为什么能高保真？
: 是proof reading 的功能很强吗》
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m********2
发帖数: 317 | 8 寿命长的物种或者说突变率低的物种是不是聚合酶的proof/reading的功能就强呢？ |
