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Biology版 - 请教Western blot 蛋白降解的问题
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M*****2
发帖数: 379
1
如果蛋白保存不当,或者-80存放时间较长,会降解
是否高分子量的蛋白更易降解呢? 还是和不同蛋白有关?
发现130Kd的2个蛋白都测不出,很多杂带,但是65kd 和20kd的都还可以测到
抗体肯定是work的很好,之前这2个大分子的蛋白也测到过的
谢谢
b**********8
发帖数: 349
2
我也发现类似现象,静待答案!
s******y
发帖数: 28562
3
最大的可能是沉淀了,
除非你在冷冻之前用液氮迅速把蛋白溶液冻起来,否则放在冰箱里慢慢的冷就会导致蛋
白溶液局部过浓而产生互相纠缠,然后就附在管壁弄不下来了。这个作用对于大分子最
明显。

【在 M*****2 的大作中提到】
: 如果蛋白保存不当,或者-80存放时间较长,会降解
: 是否高分子量的蛋白更易降解呢? 还是和不同蛋白有关?
: 发现130Kd的2个蛋白都测不出,很多杂带,但是65kd 和20kd的都还可以测到
: 抗体肯定是work的很好,之前这2个大分子的蛋白也测到过的
: 谢谢

M*****2
发帖数: 379
4
这蛋白是来自tissue的,所以更加复杂,收的时候也没有很好的保存,也几乎一年了,
哎。。。
现在直接提取之后就是一堆杂带,头疼~
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