b******n
发帖数: 4225 | 1 DSRed好像经常有这种问题
空质粒可以有红色荧光
一旦跟别的蛋白做成融合蛋白就无法产生红色荧光了 |
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M******y
发帖数: 9 | 2 请问各位有做过肠道的whole-mount免疫荧光吗？
最后是怎么把组织展开固定到slide上的？还是一开始就把组织固定到slide上了？
我第一次做免疫荧光，而且周围实验室的人都没做过，555~
可以把您的protocol发给我参考一下吗？网上查的protocol都是用胚胎或神经做的
谢谢了！拜托了！ |
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E*C
发帖数: 1629 | 3 谢谢回复，问一句，细胞自身荧光会到什么强度吗？为啥我在PE下看不到自身荧光呢 |
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f*******e
发帖数: 628 | 4 TIRF 下应该能用 SIT 或者 CCD camera 看到单分子荧光，从镜头直接看过去费点儿眼
力。不过我觉得你看到的亮和暗应该是荧光分子活动造成的进入和退出你的那个 TIRF
的 excitation spot/plane，就是那个 evanescent wave 区域，不是所谓的 blinking。 |
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W****7
发帖数: 426 | 5 请教下哈~
有没有什么好的方法标记短肽（20-30aa）的？要求荧光分子比较小的，主要是想看这
个短肽到底能不能进到细胞内，还是只是结合在细胞膜上。或者不用荧光别的方法能检
测也行。。。。
谢谢！ |
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b******s
发帖数: 1089 | 6 如果你使用的是一般的laser scanning confocal的话，根据laser source的不同，有
几种固定波长的laser，可以选择。即使不是正好在所谓的maximum上，前后一定范围内
的也是很好用的。488nm既可以激发GFP，也可以很好的激发YFP。你可以设置搜集的
emission的波长，尤其是有两种颜色的荧光的时候。
mRFP和mCherry等都是从最早的DsRed改造过来的。m代表他们大多是单体（我印象里是
这样的），因为dsRed很容易形成四聚体。但是经过改造之后，excitation和emission
都有所变化。但是基本上580nm/610nm都可以很好用。mCherry荧光强度最高，但是mRFP
也很不错。
怎么查？google就可以了。虽然mRFP有很多突变体，Q66M或者是你的Q66T等，主要是促
进了蛋白折叠成熟，用580nm/610nm应该没问题。 |
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p*****e
发帖数: 332 | 7 讲个很清楚，门外汉学习了
照，成像的分辨率差没关系，只要信号足够亮，定位精确度可以比成像分辨率高很多。
打个比方，我和个朋友约个地方碰头，出门忘了带眼镜，看啥都不太清楚，不过运气好
，碰头的地方就只一个人站br />
一个约200nm直径的模糊光团，但是如果事先知道这肯定是个单分子，那么这个模糊光
团的中心肯定是这个分子的位置。这个中心定位的准确性，决定于我拍到的光团的亮度
，越亮的光团，中心定位越准。但是，如果我事先不知道br />
没法保证这里面每个荧光分子间距足够开，所以尽管这个定位的方法很简单，可是没法
直接用在生物成像上。PALM和STORM的创新在于，找到了方法，能随机把荧光分子来来
回回在不发光的状态和发光状态之间调制。每次曝光之前，他们把大多数分子调到off
s
off switching是个随机过程，也就是说即使能做到>99%的单分子都分得很开，也没人
能100％保证没有挤成一团发光的分子。疑似来自多分子的光团需要在图像处理中去掉
。我不是做这个的，具体方法 |
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a*q
发帖数: 2109 | 8 FCS不是严格意义上的单分子技术，简单说，就是把观测体积降到特别小（比如用
confocal）。这样的话在可观测体积内的分子个数也会特别少。因为分子在不断扩散进
进出出，所以检测到的荧光信号随体积内分子个数的变化有涨落，分子个数越少，涨落
相对越大。这样从涨落的幅度可以得到平均分子个数，平均荧光信号强度除以这个分子
个数就得到每一个分子的平均亮度；从涨落的时间尺度可以得到分子扩散经过这个体积
的时间，也就可以得到扩散系数。跟FRAP比，FCS完全是在平衡态做实验的。 |
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z********g
发帖数: 48 | 9 4Pi是用两个相对的物镜变相地把数值孔径变大了，其在Z轴上的分辨率在100nm左右。
而且两个直接相对、距离很近的物镜，把样品的厚度也限制了，大概在数十微米以下。
在此基础上加入STED，难度不是一般的大啊！
旋转样品的方法倒是不错，如果用油镜或水镜就麻烦了。
我知道 Yale 的年轻AP Dr. Joerg Bewersdorf，把STED与TIRF结合起来，这样可以把Z
轴的分辨率做到50nm以下。
这也是一种结合型的创新，但这种方法也受制于TIRF的局限，只能用于观察细胞表面的
活动，不能观察到细胞内部生物大分子的活动。
娃娃鱼同学给我们解释了很多光学物理的原理，让大伙受益非浅。
西瓜同学的解卷积想法很有启发。
学化学的同学，对于分子的概念很强。
学生物的同学，对于biological events很熟悉。
多来点学光学、学物理的同行，大家一起交流，共同进步。
第一页中，Sunnyday说的荧光强度呈现某种非线性分布（如高斯分布），可用数学或光
学方法进行过滤优化分辨率，但我怀疑这种处理可能不能使分辨率远小于200nm。专家
指点一下吧。
ahvy, don't take it ... 阅读全帖 |
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a*q
发帖数: 2109 | 10 另一个关键的区别在于SAXS和冷冻电镜都需要纯化的样品。如果电镜在细胞里面的话，
至少需要能够从形貌上分辨出要看什么分子。大的结构比如说核糖体、微管可以认出来
，如果随便挑一个分子就很难说了，一大堆长的差不多的。荧光的方法就不一样，信号
的来源是知道的。
当然就分辨率而言，荧光还是比不过电镜，毕竟波长的区别在那里。 |
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s******y
发帖数: 28562 | 11 我倒。。。我还是没有理解你的问题。
你是试图在说STORM microscopy的逻辑思路不对么？
还是说super resolution microscopy不能用于某些科研场合？
如果是前者，其实那个仪器的逻辑是没有问题的。因为需要成像的对象
要么就是用抗体特异的标记了(STORM)，要么就是用荧光蛋白融合表达了(PALM)。
所以仅仅是瞬时成像的时候被激发的荧光点有随机性而已，但是总体对象是
不随机的，所以叠加起来之后应该就是一个总体的图了。
如果你是说后者，那么谁也没有指望光学显微镜能够什么问题都能回答呀，
仅仅对于某些特定样品特定用途有用而已。
microscopy的 |
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z********g
发帖数: 48 | 12 抛砖引玉先。
十年前听过Sunney Xie的报告，讲近场拉曼成像，就是CARS。不久前的年会上，他又讲
了最新的进展，已经能做到实时成像了，能看到血红细胞在血管里的流动，能区分皮肤
表面组织的大致成分，还能区分出动物脑中的癌变部位。主要是用拉曼谱的两个波长，
lipid 2845 cm-1, protein 2950 cm-1.
我的粗浅理解是，只要能得到可解析的信噪比，成像就是激光扫描和后续处理的事了，
至于精度可能不能要求太高，但贵在不用标记，完全Non-invasive。只是近场拉曼成像
，要求样品紧贴物镜，对于其应用稍有限制，或许将来可以用手持式光纤的方法直接用
到临床，这样手术中主刀医生就不用等病理切片的结果出来就可以判断哪些是病变组织
需要切除的。
听过钱永健的一次报告，他是做GFP起家的，所以他的方法是用免疫或转基因的方法将
癌变组织标记上荧光，这样医生直接切除有荧光的组织即可。
Sunney Xie是实验方法创新的大牛。对于研究工具与研究方法的改进和创新，是中国学
术界需要大力改进思维定势的地方，老是用已商业化的机器，只能跟在别人后面跑，做
不到最前沿。
其他同学再... 阅读全帖 |
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a*q
发帖数: 2109 | 13 就我所知道的谢晓亮的工作，特别早期的时候（94、95年左右）是用近场光学显微镜做
单分子检测，算是单分子荧光检测这一行最早的一批人。当年他跟Eric Betzig是直接
竞争对手，不过两个人现在都不做这个了。其实他到Harvard之后还做过一阵近场显微
镜，想看光合作用那些蛋白质的空间分布，后来放弃了，然后STORM之类的方法就出来
了。
96、97年前后开始做单分子酶学，就是用跟踪分析单个酶分子的反应过程。一大发现是
同一个酶分子的活性随时间在不断变化。这个方向做了几乎有10年，文章无数。
差不多那个时候开始的还有CARS，一直到现在都在做，前面都讨论过了。最近一个大的
突破是SRS，08年发的。其实这已经不是CARS了，光谱有很大的不同。SRS看的是由于拉
曼散射造成一束激光的能量被转移到另一束激光，这需要检测到激光能量大概10^-7的
变化，但最终灵敏度比CARS高很多。用跟SRS同样的手段还可以对有吸收但是不发荧光
的东西成像（比方说血红素）。
在Harvard开始的方向是在单细胞+单分子水平上观察细菌基因的表达和调控，主要是分
析Transcription和Translati... 阅读全帖 |
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i****g
发帖数: 3896 | 14 介绍的很全面，谢涵盖的方向还真广。他最突出的贡献还是发明CARS和SRS吧？
就我所知道的谢晓亮的工作，特别早期的时候（94、95年左右）是用近场光学显微镜做
单分子检测，算是单分子荧光检测这一行最早的一批人。当年他跟Eric Betzig是直接
竞争对手，不过两个人现在都不做这个了。其实他到Harvard之后还做过一阵近场显微
镜，想看光合作用那些蛋白质的空间分布，后来放弃了，然后STORM之类的方法就出来
了。
96、97年前后开始做单分子酶学，就是用跟踪分析单个酶分子的反应过程。一大发现是
同一个酶分子的活性随时间在不断变化。这个方向做了几乎有10年，文章无数。
差不多那个时候开始的还有CARS，一直到现在都在做，前面都讨论过了。最近一个大的
突破是SRS，08年发的。其实这已经不是CARS了，光谱有很大的不同。SRS看的是由于拉
曼散射造成一束激光的能量被转移到另一束激光，这需要检测到激光能量大概10^-7的
变化，但最终灵敏度比CARS高很多。用跟SRS同样的手段还可以对有吸收但是不发荧光
的东西成像（比方说血红素）。
在Harvard开始的方向是在单细胞+单分子水平上观察... 阅读全帖 |
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p*****e
发帖数: 332 | 15 讲个很清楚，门外汉学习了
照，成像的分辨率差没关系，只要信号足够亮，定位精确度可以比成像分辨率高很多。
打个比方，我和个朋友约个地方碰头，出门忘了带眼镜，看啥都不太清楚，不过运气好
，碰头的地方就只一个人站br />
一个约200nm直径的模糊光团，但是如果事先知道这肯定是个单分子，那么这个模糊光
团的中心肯定是这个分子的位置。这个中心定位的准确性，决定于我拍到的光团的亮度
，越亮的光团，中心定位越准。但是，如果我事先不知道br />
没法保证这里面每个荧光分子间距足够开，所以尽管这个定位的方法很简单，可是没法
直接用在生物成像上。PALM和STORM的创新在于，找到了方法，能随机把荧光分子来来
回回在不发光的状态和发光状态之间调制。每次曝光之前，他们把大多数分子调到off
s
off switching是个随机过程，也就是说即使能做到>99%的单分子都分得很开，也没人
能100％保证没有挤成一团发光的分子。疑似来自多分子的光团需要在图像处理中去掉
。我不是做这个的，具体方法 |
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a*q
发帖数: 2109 | 16 FCS不是严格意义上的单分子技术，简单说，就是把观测体积降到特别小（比如用
confocal）。这样的话在可观测体积内的分子个数也会特别少。因为分子在不断扩散进
进出出，所以检测到的荧光信号随体积内分子个数的变化有涨落，分子个数越少，涨落
相对越大。这样从涨落的幅度可以得到平均分子个数，平均荧光信号强度除以这个分子
个数就得到每一个分子的平均亮度；从涨落的时间尺度可以得到分子扩散经过这个体积
的时间，也就可以得到扩散系数。跟FRAP比，FCS完全是在平衡态做实验的。 |
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z********g
发帖数: 48 | 17 4Pi是用两个相对的物镜变相地把数值孔径变大了，其在Z轴上的分辨率在100nm左右。
而且两个直接相对、距离很近的物镜，把样品的厚度也限制了，大概在数十微米以下。
在此基础上加入STED，难度不是一般的大啊！
旋转样品的方法倒是不错，如果用油镜或水镜就麻烦了。
我知道 Yale 的年轻AP Dr. Joerg Bewersdorf，把STED与TIRF结合起来，这样可以把Z
轴的分辨率做到50nm以下。
这也是一种结合型的创新，但这种方法也受制于TIRF的局限，只能用于观察细胞表面的
活动，不能观察到细胞内部生物大分子的活动。
娃娃鱼同学给我们解释了很多光学物理的原理，让大伙受益非浅。
西瓜同学的解卷积想法很有启发。
学化学的同学，对于分子的概念很强。
学生物的同学，对于biological events很熟悉。
多来点学光学、学物理的同行，大家一起交流，共同进步。
第一页中，Sunnyday说的荧光强度呈现某种非线性分布（如高斯分布），可用数学或光
学方法进行过滤优化分辨率，但我怀疑这种处理可能不能使分辨率远小于200nm。专家
指点一下吧。
ahvy, don't take it ... 阅读全帖 |
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a*q
发帖数: 2109 | 18 另一个关键的区别在于SAXS和冷冻电镜都需要纯化的样品。如果电镜在细胞里面的话，
至少需要能够从形貌上分辨出要看什么分子。大的结构比如说核糖体、微管可以认出来
，如果随便挑一个分子就很难说了，一大堆长的差不多的。荧光的方法就不一样，信号
的来源是知道的。
当然就分辨率而言，荧光还是比不过电镜，毕竟波长的区别在那里。 |
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s******y
发帖数: 28562 | 19 我倒。。。我还是没有理解你的问题。
你是试图在说STORM microscopy的逻辑思路不对么？
还是说super resolution microscopy不能用于某些科研场合？
如果是前者，其实那个仪器的逻辑是没有问题的。因为需要成像的对象
要么就是用抗体特异的标记了(STORM)，要么就是用荧光蛋白融合表达了(PALM)。
所以仅仅是瞬时成像的时候被激发的荧光点有随机性而已，但是总体对象是
不随机的，所以叠加起来之后应该就是一个总体的图了。
如果你是说后者，那么谁也没有指望光学显微镜能够什么问题都能回答呀，
仅仅对于某些特定样品特定用途有用而已。
microscopy的 |
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z********g
发帖数: 48 | 20 抛砖引玉先。
十年前听过Sunney Xie的报告，讲近场拉曼成像，就是CARS。不久前的年会上，他又讲
了最新的进展，已经能做到实时成像了，能看到血红细胞在血管里的流动，能区分皮肤
表面组织的大致成分，还能区分出动物脑中的癌变部位。主要是用拉曼谱的两个波长，
lipid 2845 cm-1, protein 2950 cm-1.
我的粗浅理解是，只要能得到可解析的信噪比，成像就是激光扫描和后续处理的事了，
至于精度可能不能要求太高，但贵在不用标记，完全Non-invasive。只是近场拉曼成像
，要求样品紧贴物镜，对于其应用稍有限制，或许将来可以用手持式光纤的方法直接用
到临床，这样手术中主刀医生就不用等病理切片的结果出来就可以判断哪些是病变组织
需要切除的。
听过钱永健的一次报告，他是做GFP起家的，所以他的方法是用免疫或转基因的方法将
癌变组织标记上荧光，这样医生直接切除有荧光的组织即可。
Sunney Xie是实验方法创新的大牛。对于研究工具与研究方法的改进和创新，是中国学
术界需要大力改进思维定势的地方，老是用已商业化的机器，只能跟在别人后面跑，做
不到最前沿。
其他同学再... 阅读全帖 |
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a*q
发帖数: 2109 | 21 就我所知道的谢晓亮的工作，特别早期的时候（94、95年左右）是用近场光学显微镜做
单分子检测，算是单分子荧光检测这一行最早的一批人。当年他跟Eric Betzig是直接
竞争对手，不过两个人现在都不做这个了。其实他到Harvard之后还做过一阵近场显微
镜，想看光合作用那些蛋白质的空间分布，后来放弃了，然后STORM之类的方法就出来
了。
96、97年前后开始做单分子酶学，就是用跟踪分析单个酶分子的反应过程。一大发现是
同一个酶分子的活性随时间在不断变化。这个方向做了几乎有10年，文章无数。
差不多那个时候开始的还有CARS，一直到现在都在做，前面都讨论过了。最近一个大的
突破是SRS，08年发的。其实这已经不是CARS了，光谱有很大的不同。SRS看的是由于拉
曼散射造成一束激光的能量被转移到另一束激光，这需要检测到激光能量的微小
变化，但最终灵敏度比CARS高很多。用跟SRS同样的手段还可以对有吸收但是不发荧光
的东西成像（比方说血红素）。
在Harvard开始的方向是在单细胞+单分子水平上观察细菌基因的表达和调控，主要是分
析Transcription和Translation的随机... 阅读全帖 |
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i****g
发帖数: 3896 | 22 介绍的很全面，谢涵盖的方向还真广。他最突出的贡献还是发明CARS和SRS吧？
就我所知道的谢晓亮的工作，特别早期的时候（94、95年左右）是用近场光学显微镜做
单分子检测，算是单分子荧光检测这一行最早的一批人。当年他跟Eric Betzig是直接
竞争对手，不过两个人现在都不做这个了。其实他到Harvard之后还做过一阵近场显微
镜，想看光合作用那些蛋白质的空间分布，后来放弃了，然后STORM之类的方法就出来
了。
96、97年前后开始做单分子酶学，就是用跟踪分析单个酶分子的反应过程。一大发现是
同一个酶分子的活性随时间在不断变化。这个方向做了几乎有10年，文章无数。
差不多那个时候开始的还有CARS，一直到现在都在做，前面都讨论过了。最近一个大的
突破是SRS，08年发的。其实这已经不是CARS了，光谱有很大的不同。SRS看的是由于拉
曼散射造成一束激光的能量被转移到另一束激光，这需要检测到激光能量大概10^-7的
变化，但最终灵敏度比CARS高很多。用跟SRS同样的手段还可以对有吸收但是不发荧光
的东西成像（比方说血红素）。
在Harvard开始的方向是在单细胞+单分子水平上观察... 阅读全帖 |
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I***a
发帖数: 13467 | 23 小鼠组织切片，想做免疫荧光，
那么组织用什么固定对后面的免疫荧光比较好。
谢谢 |
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l****o
发帖数: 442 | 24 online搜索了一下，有人说必须要专用滤光片，有人说跟GFP一样直接用蓝光激发就能
看到比GFP弱一些的绿色荧光。
因为本人实验室经费有限，如果就普通倒置荧光显微镜下观察比较方便，不知道可不可
行，恳求做过的网友给予指导。
谢谢 |
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b******s
发帖数: 1089 | 25 固定剂的选择应当跟你的实验目的结合。methonal会使得蛋白变性而PFA只是可逆性得
交联蛋白。GFP变性了当然就看不到荧光了。用抗体应该还是可以看到荧光的，但是作
为细胞内蛋白的定位，还是应当用PFA。methonal对整个细胞的extraction太大，而且
会使核酸和蛋白发生聚集沉淀。
可能会有artifacts。所以ethonal和methonal只适用于组织形态学的实验。 |
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m*****u
发帖数: 15526 | 26 我用flow cytometry 测核内transcription factor就得用methanol处理。同时想看细
胞YFP荧光基本上就不可能了。如果哪个大虾有合适的protocol,不淬灭YFP,同时又能标
记上transcription factor的，麻烦提供一下。包子酬谢。有好的flow cytometry 用
的抗YFP荧光抗体，能标记上methanol处理过的细胞的也行。 |
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x******6
发帖数: 20 | 27 小弟需要用一些荧光标记的BMP-2，但是这东西在弱碱性条件下不溶，样品又只有几百
个微克，能不能大牛推荐一个盒子，能在弱酸环境里标记上荧光，多谢啦！ |
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b**********3
发帖数: 165 | 28 弱弱地问，想把几个个荧光图像所有像数的荧光强度积分出来，然后进行粗略的量化比
较，请问什么软件可以最简单地实现？基本操作能否说明一下，imageJ应该可以，试了
两次没搞出来，请指教，谢谢 |
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c********r
发帖数: 23 | 30 现在养的细胞在玻璃的coverslip上长的形态不好，可是在culture dish里没问题。在
玻璃coverslip上附着了poly-lysine/collagen/gelatin也没有太大帮助。想试一下
plastic或其他材质的coverslip/slide, 但查了一下好像一般autofluorescence比较强
。由于后续要做荧光染色，需要用到FTIC/rhodamine/DAPI，普通的plastic可能不行。
lab-tek有一种permanox plastic chamberslide号称minimal autofluorescence，不知
有人用过没？如果有人知道其他材质的plastic coverslip/slide适合用于荧光染色也
麻烦推荐一下。非常感谢！ |
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s******y
发帖数: 28562 | 31 如果辐射强度很大的话，各种有机分子（包括荧光分子或者荧光蛋白）会全部变性，就
什么光都没有了 ：）
如果是弱辐射倒还可以试试。 |
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b***2
发帖数: 348 | 32 GFP 27kD,基因750bp的样子，应该算是很小的荧光蛋白了。
绝大部分荧光蛋白都比他大，或者会形成oligomer |
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m*****g
发帖数: 21 | 33 没什么相关经验，但是两个donor两种荧光，是不是丢掉了很多只用一种荧光也能突变
两个拷贝的细胞？ |
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y*******9
发帖数: 360 | 34 我的荧光谱图有很强的散射背景，荧光被散射峰遮盖得不明显了，有什么软件可以
normalize掉这些散射背景。谢谢。 |
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v*****s
发帖数: 20290 | 35 1 那是自然，不过notch filter很贵，一般的LPF就算cut很sharp也没多少钱。这个也
取决于你的荧光和散射分得有多开。
2 取决于你光的偏振态，如果是一般的日光，完全非偏振光，理论上讲是50%。不过荧
光未必就是完全非偏振光了。这个我没做过，不好乱讲，应该会取决于你荧光态的寿命
和转动的快慢。 |
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k******e
发帖数: 32 | 36 我用荧光小分子标记了一个几个微米的胶体粒子，记得以一种技术可以看单个粒子上的
荧光均匀性，一时记不起来了，那位大侠知道指定一声... |
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c******d
发帖数: 564 | 37 我是外行，有个关于荧光光谱的问题请教。 比如下面这大约十种荧光集团，单靠光谱
分析能分出来吗？
或者转化成另外一个问题，MAx EM 只差 5， 6 nm，这两个基团能靠光谱分析分开吗？
溶液环境一致但是较复杂，是PCR反应产物，里面有0.5mM MgCl2，0.05mM dNTP，DNA，
痕量protein等。
多谢指点
Dye Max. EX (nm) Max.EM (nm)
6-FAM 494 515
JOE™ 520 548 BHQ-1,
TET 521 536
Cal Fluor® Gold 5401 522 541
HEX2 535 555
Cal Fluor Orange 5602 540 561
TAMRA™ 555 576
Cy3® 550 570
Quasar® 5703 548 566
Cal Fluor Red 5904 565 588
ROX™ 573 602
Texas Red® 583 603
Cy5® 651 674
Quasar 6705 647 667
Cy5.5... 阅读全帖 |
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v*****s
发帖数: 20290 | 38 荧光一般就是从S1->S0的radiative decay，对吧。
然后，energy gap law说S1->S0的nonradiative decay是随两个态之间的energy gap指
数下降的，可S1上的粒子总是要蹦下来的，既然nonradiative的下降了，那Radiative
的就必须上升。这岂不是说S1和S0之间的能量差越大，荧光越强？这个不太符合直观想
象啊。
最后，求达人指教T1的情况，也就是Phosphorescence中的el-sayed's rule。 |
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y****i
发帖数: 1504 | 39 讲英文的同学搞飞秒的吧?把问题整这么复杂。如果k_r 减少比k_nr还快，就是说短波
长的荧光比长波长的荧光量子产率低，你随便搜一下量子产率的standard就知道没这么
一说。 |
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r**x
发帖数: 408 | 40 我这个载体是NONPOROUS SILICA,12nm，表面积200m2/g，上面生长了一些高分子，我先
后做了好几个样，都是在激发的时候，比方说500nm激发，瑞利散射的峰都超过了量程
（1000），但是荧光也才是不到100，我要是多LABEL一些荧光上去的话有用吗？ |
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f****e
发帖数: 36 | 41 由于实验原因，需要测试高温原位荧光光谱，980 纳米激发，发射在400-700 纳米。不
知哪里有此类设备？样品所需加热温度最低要500摄氏度，600摄氏度最好。同时希望能
够测试到样品的荧光光谱（希望有）。非常感谢！ |
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c*s
发帖数: 2145 | 42 发信人: dengyu(柯斯塔), 信区: NanoST. 本篇人气: 42
标 题: 荧光和磷光有什么区别（转自清华）
发信站: 南京大学小百合站 (Wed Jun 11 16:41:06 2003)
☆━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━☆
t***[email protected] 的发言如下:
☆━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━☆
转信站: ZJUBBS!news.happynet.org!maily.cic.tsinghua.edu.cn!SMTH
磷光是T1 > S0
荧光是S1 > S0
一般来说
☆━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━☆
c******[email protected] 的发言如下:
☆━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━☆
转信站: ZJUBBS!news.happynet.org!maily.cic.tsinghua.edu.cn!SMTH
区别还是明显的
☆━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━☆
t***[email protected] 的发言如下:
☆━━━━━━━ |
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w********h
发帖数: 12367 | 43 * 饶毅 作
【 以下文字转载自 Chemistry 讨论区 】
发信人: kram (一天到晚游泳的鱼), 信区: Chemistry
标 题: 美妙的生物荧光分子与好奇的生物化学家（zz）
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Oct 5 11:34:27 2008)
下村修
一位做出值得诺贝尔奖工作的科学家，几十年默默无闻；
一项被广泛应用的成果，很少人知其发明者；
一篇原始论文鲜为人知，后继论文却很热门；
一位曾失明的人，却发现发光的蛋白质；
一个低调的父亲，却有非常高调的儿子。
在这篇文章中，我讲述一个科学家的故事，介绍一项生物化学研究的历史故事，还回答
一个问题：是否活着的科学家中还有因好奇而做科学研究？
科学家一般生平较简单，没特别有趣的故事。2007年诺贝尔奖得主、意大利裔美国科学
家卡佩基（Mario Cappechi）在二战中做流浪儿，是个难得的例子。日裔美国科学家下
村修（Osamu Shimomura，下村脩），也在二战有特别经历。这里先简介他的科学研究
，然后感慨。
生物发光和荧光蛋白
下村修和已故美国科学家约翰森（Frank H. Johnson）发现 |
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x********8
发帖数: 167 | 44 我根据你的评论会再读一遍文章，并且添加你的这段评论到我的博客上 ：）
能量转移机制实际上还是猜测，因为排除了电荷转移机制。荧光来自小碎片？倒真是有
可能。
另外根据能量转移机理，必定需要观察到纯处理过碳管上碎片的荧光和吸收的变化，作
者似乎这方面并没有有力的实验数据支持。
第一印象来说，这个实验结果比较怪！ |
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C*********r
发帖数: 2671 | 45 【 以下文字转载自 Engineering 讨论区 】
发信人: CincySniper (Cincy Sniper), 信区: Engineering
标 题: 做荧光粉体的phd机会多吗
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Sep 29 22:27:52 2013, 美东)
有个哥们在厦大硕士毕业，一直在做led荧光粉体，我也不做这个，求教下这个phd
position机会多吗？
现在发展前景如何？就业情况？
多谢各位了！ |
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f****e
发帖数: 36 | 46 由于实验原因，需要测试高温原位荧光光谱，980 纳米激发，发射在400-700 纳米。不
知哪里有此类设备？样品所需加热温度最低要500摄氏度，600摄氏度最好。同时希望能
够测试到样品的荧光光谱（希望有）。非常感谢！ |
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f****e
发帖数: 36 | 47 由于实验原因，需要测试高温原位荧光光谱，980 纳米激发，发射在400-700 纳米。不
知哪里有此类设备？样品所需加热温度最低要500摄氏度，600摄氏度最好。同时希望能
够测试到样品的荧光光谱（希望有）。非常感谢！ |
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r*******6
发帖数: 545 | 48 用激光激发。如果两张染料激发波长一样，发出的荧光颜色就应该一样对吗？
比如：DID和BODIPY650/665 两个近红外染料在625激发，675发射。他们的荧光图像颜
色是一样的，对吗？ |
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r*******6
发帖数: 545 | 49 更正一下笔误，应该是发射波长相近，颜色应该相似，对吗？
只要是荧光光谱，不过是不是近红外，都遵守这个原则：激发光下荧光光谱差不多，那么颜色就应该差不多，对吗？
谢谢1 |
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f****e
发帖数: 36 | 50 由于实验原因，需要测试高温原位荧光光谱，980 纳米激发，发射在400-700 纳米。不
知哪里有此类设备？样品所需加热温度最低要500摄氏度，600摄氏度最好。同时希望能
够测试到样品的荧光光谱（希望有）。非常感谢！ |
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